過氧化氫和過氧化物酶活性檢測試劑盒(熒光法)

品牌：紀(jì)寧生物
貨號：JN40457
規(guī)格： 96樣

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產(chǎn)品詳情

中文名稱： 過氧化氫和過氧化物酶活性檢測試劑盒(熒光法)

產(chǎn)品規(guī)格：微量法 96樣

檢測原理：熒光法/比色法

測定意義

H2O2 是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化產(chǎn)生，由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面，H2O2 可以直接或間接地氧化細胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細胞膜遭受損害，從而加速細胞的衰老和解體；另一方面H2O2 也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。POD（EC 1.11.1.7）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。

測定原理

該測定試劑盒使用 Amplex? Red 試劑（10-乙酰基-3,7-二羥基吩噁嗪）檢測過氧化氫 (H2O2 或過氧化物酶活性。Amplex? Red 試劑與辣根過氧化物酶 (HRP) 配合使用以檢測從生物樣品（包括細胞）中釋放或在酶偶聯(lián)反應(yīng)中生成的 H2O2。此外，當(dāng) H2O2過量時，Amplex? Red 試劑也可用作過氧化物酶活性的超靈敏測定試劑。在存在過氧化物酶的情況下，Amplex? Red 試劑與 H2O2以 1:1 的化學(xué)計量比發(fā)生反應(yīng)，生成紅色熒光氧化產(chǎn)物試鹵靈。

需自備的儀器和用品

天平、離心機、熒光酶標(biāo)儀/酶標(biāo)儀、、移液器、渦旋混勻儀、黑色96孔板/酶標(biāo)板、勻漿器。

試劑組成和配制：

試劑名稱	規(guī)格	數(shù)目	貯藏
提取液	液體100mL	X2	4℃
試劑一	液體200uL	x1	4°C,避光	取10μL試劑一和990 μL提取液混勻即為試劑一A取8.85 uL試劑一和991.15 uL緩沖液混勻即為試劑一A
試劑二	粉劑	x1	-20℃,避光	臨用前加入6mL提取液溶解，分裝凍存，避免反復(fù)凍融。
試劑三	粉劑	X2	-20℃,避光	臨用前加入78μL試劑四（預(yù)先恢復(fù)至室溫）溶解，現(xiàn)用現(xiàn)配，不可保存。臨用前加入每支77.75uL試劑四（預(yù)先恢復(fù)至室溫）溶解，現(xiàn)用現(xiàn)配，不可保存。
試劑四	液體	x1	4°C,避光

預(yù)實驗的意義

比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；

4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；

5、通過3 - 5組預(yù)實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。

注意

1、正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定；

2、為了您的安全和健康，請佩戴好防護用具；

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過氧化氫和過氧化物酶活性檢測試劑盒(熒光法)

產(chǎn)品詳情