產品規(guī)格 ： 微量法/48樣
檢測原理 ： 熒光法
測定意義
土壤磷酸單酯酶活性是連接生物過程與土壤磷有效性的核心功能性指標，兼具基礎研究價值（揭示磷循環(huán)機制）與應用指導意義（優(yōu)化農業(yè)管理、評估生態(tài)健康）。其測定為理解土壤-植物-微生物互作、實現(xiàn)資源高效利用及生態(tài)系統(tǒng)可持續(xù)管理提供了關鍵科學依據。
測定原理
S-PME分解4-MUF-磷酸酯，產生熒光物質,通過測定熒光值升高速率來計算S-PME活性。
自備用品
酶標儀、臺式離心機、恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液器、黑色96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一：液體60mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃避光保存(臨用前加入0.24mL試劑三溶解后加入11.76mL蒸餾水混勻)；
試劑三：液體8mL×1瓶 ,常溫避光保存；
標準品：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。
樣品處理
新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干，過30~50目篩。按照土壤質量（g）：試劑一（mL)為1： 5~10 的比例（建議稱取約0.1g土壤，加入1mL試劑一），冰浴勻漿混勻3min，制成勻漿待測液。
測定步驟
1、熒光酶標儀預熱30min以上，設置激發(fā)光波長 355 nm，測定波長 450nm。
2、加樣表
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試劑名稱
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測定管
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空白管
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震蕩條件下取勻待測液（μL）
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200
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-
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蒸餾水（μL）
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-
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200
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試劑一（μL）
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200
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200
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混勻， 30℃避光振蕩反應3h后， 3000g 4℃離心3min，取上清液200μL于黑色96孔板中，檢測熒光值，激發(fā)波長355nm，發(fā)射波長450nm。熒光值分別為A測定管，A空白管，計算ΔA=A測定管-A空白管。
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預實驗的意義
比色法檢測試劑盒預實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數是否合適；
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調整；
5、通過3 - 5組預實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應稀釋濃度范圍，指導實驗樣本稀釋比例。
注意
正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。
