120-73-0 / 嘌呤的檢測(cè)方法

背景及概述^[1][2]

嘌呤是一種含氮的雜環(huán)化合物。由一個(gè)嘧啶環(huán)和一個(gè)咪唑環(huán)并合而成。嘌呤堿都是母體嘌呤的衍生物。各種RNA和DNA分子中都含有相同的兩種嘌呤堿，即腺嘌呤和鳥(niǎo)嘌呤。此外，體內(nèi)還有自由存在的嘌呤堿，例如黃嘌呤、次黃嘌呤、尿酸等。前兩者是核酸分解代謝的中間產(chǎn)物，后者是核酸分解代謝的最終產(chǎn)物之一，尿中含量較多。用途：用于有機(jī)合成，作新陳代謝研究。

檢測(cè)方法^[3]

方法一、食物中鳥(niǎo)嘌呤和腺嘌呤的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

一、儀器和溶液配制：

1、儀器：液相色譜儀(配紫外檢測(cè)器)：Agilent1260LC；水浴鍋：90℃； 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；pH計(jì)；十萬(wàn)分之一天平

2、溶液的配制

(1)氫氧化鈉溶液(0.1mol/L)：準(zhǔn)確稱(chēng)量0.4g氫氧化鈉用水定容到100mL。

(2)鳥(niǎo)嘌呤標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱(chēng)取一定質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)品，加入5mL氫氧化鈉溶液 溶解，用水定容到100mL，配成500mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

(3)線(xiàn)嘌呤標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱(chēng)取一定質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)品，加入5mL氫氧化鈉溶液 溶解，用水定容到100mL，配成500mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

(4)鳥(niǎo)嘌呤和腺嘌呤混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取一定體積的鳥(niǎo)嘌呤和腺嘌呤標(biāo)準(zhǔn) 儲(chǔ)備液，配制成100mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

(5)乙酸銨溶液(流動(dòng)相)：準(zhǔn)確稱(chēng)取1.54g乙酸銨，用水定容到1L，用 磷酸將pH調(diào)至3.0。

(6)三氟乙酸?甲酸溶液：以體積比1∶1配制三氟乙酸、甲酸的混酸溶液。

方法二、一種基于酶催化的細(xì)胞內(nèi)嘌呤電化學(xué)檢測(cè)方法，它涉及一種細(xì)胞內(nèi)嘌呤堿基的檢測(cè)方法。本發(fā)明要解決采用現(xiàn)有技術(shù)無(wú)法獲得細(xì)胞內(nèi)核苷酸代謝過(guò)程中嘌呤單質(zhì)含量的問(wèn)題。本發(fā)明方法：一、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：通過(guò)電化學(xué)檢測(cè)儀得到電化學(xué)信號(hào)計(jì)算峰面積，繪制每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；二、裂解液的二次電化學(xué)檢測(cè)：待檢測(cè)細(xì)胞的裂解液經(jīng)第一次電化學(xué)檢測(cè)，得到黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤混合信號(hào)峰和腺嘌呤-次黃嘌呤混合信號(hào)峰；加入黃嘌呤氧化酶溶液后經(jīng)第二次電化學(xué)檢測(cè)，得到鳥(niǎo)嘌呤信號(hào)峰和腺嘌呤信號(hào)峰；三、計(jì)算單嘌呤的含量：用加黃嘌呤氧化酶前得到的峰面積減去加黃嘌呤氧化酶后得到的峰面積，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，求出每種嘌呤堿基的含量。本發(fā)明用于細(xì)胞檢測(cè)領(lǐng)域。

主要參考資料

[1] 兒科學(xué)辭典

[2] 化合物詞典

[3] [中國(guó)發(fā)明] CN201310138043.1 食物中鳥(niǎo)嘌呤和腺嘌呤檢測(cè)方法